*Laboratorio de Cultivo de Tejidos
**Programa de Cactáceas
El ejemplar examinado pertenecía al Ing. Hamlet Chírinos Urbina, oriundo del Perú y actualmente Director de Fitotecnia del ITESM-CQ; según Chírinos (pers. comm.), esta especie crece naturalmente en la localidad de Bagua (Departamento de Amazonas), en el n orte del Perú.
Las semillas se sembraron en medio de Murashige y Skoog (1962) libre de reguladores de crecimiento, complementado con 100 mg/l de mio-inositol, 1 mg/l de tiamina, 30 g/l de sacarosa, 7 g/l de agar (Bioxon) y l.5 g/l de carbón activado. El pH se ajustó a 5 .7. El medio nutritivo se esterilizó en autoclave durante 20 minutos a 1.3-1.4 kg/cm2.
El material se incubó a 25(±)2°C de temperatura, iluminación de 700 lux (luz difusa) y fotoperiodo de 16 horas luz.
Posteriormente, las plántulas obtenidas de l cm de longitud se subcultivaron en un medio basal similar al antes mencionado, pero con diferentes concentraciones de citocininas (6-bencil-aminopurina (BA), 5 mg/l y 2-isopentenil-adenina (2iP), 2 mg/l) y auxi nas (ácido naftalenacético (ANA), 1 y 0.3 mg/l).
En esta fase se omitió el uso de carbón activado, incubándose en condiciones similares a la germinación. Se observó la formación de múltiples brotes en el medio con 5 mg/l de BA y 1 mg/l de ANA, sin embargo una tercera parte de ellos estaban hiperhidratad os. En el medio que contenía 2 mg/l de 2iP y 0.3 mg/l de ANA se produjo una menor cantidad de brotes, pero no se detectó hiperhidratación.
Figura 1 : Cultivo in vitro de Melocactus bellavistensis
Para el enraizamiento se probaron dos medios, uno libre de reguladores de crecimiento y con 1.5 g/l de carbón activado y otro con ácido indol butírico (AIB, 1 mg/l). En este caso, la iluminación fue de 2000 lux. No se observaron diferencias entre los dos medios, ya que en ambos se obtuvo un porcentaje de enraizamiento similar (90-95%).
Las plántulas enraizadas se aclimataron a condiciones de invernadero en una cámara con temperatura media diurna de 20 a 25°C (no controlada), iluminación media de 3000 lux (rango aproximado de 1500 a 10000 lux) y humedad relativa superior al 50%. Las plán tulas se trasladaron a bandejas tipo "Speedling" (bandeja hortícola con cavidades que permiten la plantación individual), con un sustrato compuesto de la mezcla comercial Sunshine Mix 3 (Sphagnum, vermiculita, dolomita y agentes humectantes), y agrolita e n una proporción de 4 a 1. El porcentaje de supervivencia obtenido fue del 80%.
Figura 2 : Plántulas enraizadas antes de transplantarlos al invernadero para su adaptación.
Finalmente, las plántulas adaptadas se transladaron a un nueva cámara, en condiciones de mayor iluminación y temperatura, así como de menor humedad relativa. En este lugar, las plantas se desarrollaron hasta alcanzar diámetros de hasta 4 cm tras 18 a 24 m eses desde el inicio del proceso de propagación.
Taylor, N.P. 1991 The genus Melocactus (Cactaceae) in Central and South America. Bradleya 9:1-80.
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